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兽用人工授精设备:猪人工授精中的几个重要环节

点击次数:   更新时间:2019-11-16 10:51:11   【关闭分    享:
1  精液品质检查
   (1)采精量。采集精液后称重,按每克1mL计,避免以量筒等测量精液的体积。
   (2)颜色。正常的精液是乳白色或浅灰色,精子密度越高,色泽愈浓,透明度愈低。带有绿色、黄色、浅红色、红褐色等异常颜色的精液应予废弃。
   (3)气味。猪精液略带腥味,如有异常气味,应废弃。
   (4)pH值(酸碱度)。用pH计或pH试纸测量,正常范围为7.0~7.8。
   (5)精子活力检查。精子活力是指呈直线运动的精子所占百分率,在显微镜下观察,一般用0.1~1.0的十级评分法估计,鲜精活力要求不低于0.7。检查活力时要求载玻片和盖玻片都应在37℃下预热。
   (6)精子密度。指每毫升精液中所含的精子数,是确定稀释倍数的重要标准。要求用血细胞计数板计数或精液密度仪测定。血细胞计数方法:以微量加样器取具有代表性的原精液200ul,用3%NaCl稀释10倍;在血细胞计数板上放一盖玻片,取1滴稀释后的精液置于计数板的槽中,靠虹吸将精液吸入计数室内;在高倍镜下计数5个中方格内的精子总数,将该数乘以50万,即得到原精液每毫升的精子数(即精液密度)。
   (7)精子畸形率。畸形率是指异常精子的百分率,一般要求畸形率不超过18%。其测定可用普通显微镜,但需进行伊红或姬姆萨染色,用相差显微镜可直接观察活精子的畸形率。公猪利用过频或高温环境会产生精子尾部带有原生质滴的畸形精子。畸形精子种类很多。要求对每头公猪每2周检查一次精子畸形率。
    2  精液的稀释、分装和储存
   (1)稀释液。稀释液按稀释液配方配制(D-葡萄糖37.15,柠檬酸三钠6.00,EDTA钠盐1.25,碳酸氯钠1.25,氯化钾0.75,青霉钠0.60,硫酸链霉素1.00),用称量纸、电子天平准确称量药品;按1000mL和2000mL剂量称量稀释粉,置于密封袋中;在大烧杯或塑料杯中套入一到两层一次性食品袋,然后将稀释粉加入,再将烧杯(或塑料杯)放在电子秤上,除皮重;通过与蒸馏水容器连接的软管将蒸馏水导入杯中(最初放出的几毫升水用其它杯接取废弃),直到将水加至规定的重量(如1000g即约1000mL);将杯子放入水浴中加热,加热后轻轻摇动,使其彻底溶解。某些稀释粉遇水后结块,溶解较慢,需将加热时间延长一些。稀释粉全部溶解后,在水浴中继续加热至所需的温度。用0.1N稀盐酸或0.1N氢氧化钠调整稀释液的pH值达7.2(6.8~7.4)左右,稀释液配好后应及时贴上标签、标明品名、配制日期和时间、经手人等。将稀释液置于冰箱内4℃下保存,时间不超过24小时。
   (2)原精液稀释后体积计算。原精液总有效精子数=原精液体积(或重量g)×精子密度(单位:个/mL)×活率。原精液稀释后可分装的份数=原精总有效精子数/每份精液中的有效精子数。原精液稀释后的体积(或重量)=原精液稀释后可分装的份数(取整数)×每份精液的体积(或重量)。每份精液中有效精子数推荐为30亿。
   (3)精液稀释。精液采集后应尽快稀释,原精储存不超过30分钟。未经品质检查或检查不合格(活力在0.7以下)的精液不能稀释。稀释液与精液要求等温稀释,两者温差不超过1℃,即稀释液应加热至33~37℃,以精液温度为标准来调节稀释液的温度,绝不能反过来操作。稀释时用一个塑料杯(1000~1500mL)放在电子秤上,除皮后将装精液的采精袋从保温杯中取出,放入大塑料杯中,并将袋口翻在杯外。如果集精容器为一次性纸杯,则需将纸杯中的精液倒入装有食品袋的塑料杯中并放在电子秤上。也可在此时称量并记录精液重量。然后向杯中徐徐加入与精液等温的稀释液,直到达到所计算的最终重量。
   (4)精液分装。一次性输精瓶的分装。将塑料杯中稀释后的精液分别加入不同的输精瓶中,使精液面达到输精瓶上相应的刻度(如100mL),然后拧上输精瓶盖。一次性输精袋分装。将输精袋的两个悬挂孔挂在专门用于分装精液的支架上,在输精袋中插上一次性塑料漏斗,放在电子秤上,然后除皮。将塑料杯中稀释后的精液通过漏斗徐徐加入输精袋中,直到达到规定的重量(如100g),取下漏斗和输精袋,挂上一个新的输精袋,再将漏斗插入,分装另一袋精液。分装后的输精袋用塑料热封口机封口。在输精瓶或袋上标明公猪品种、耳号、生产日期、保存有效期、稀释液名称和生产单位等。
   (5)精液储存。将分装后的输精容器放入泡沫塑料盒中,在室温下缓慢降温30分钟后,再将输精容器放入17℃恒温箱内的搁架上保存。保存过程中不要频繁打开冰箱,并且每隔12小时轻轻翻转一次,防止精子沉淀而引起死亡。短效稀释液可保存3天,中效稀释液可保存4~6天,长效稀释液可保存7~9天,无论用何种稀释液保存精液,都应尽快用完。

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